PRP Moden: "PRP Klinikal"
Dalam tempoh 10 tahun yang lalu, skim rawatan PRP telah mengalami perubahan yang besar.Melalui penyelidikan eksperimen dan klinikal, kami kini mempunyai pemahaman yang lebih baik tentang platelet dan fisiologi sel lain.Di samping itu, beberapa penilaian sistematik berkualiti tinggi, meta-analisis dan ujian terkawal rawak telah menunjukkan keberkesanan bioteknologi PRP dalam banyak bidang perubatan, termasuk dermatologi, pembedahan jantung, pembedahan plastik, pembedahan ortopedik, pengurusan kesakitan, penyakit tulang belakang dan perubatan sukan. .
Ciri semasa PRP ialah kepekatan platelet mutlaknya, yang berubah daripada takrif awal PRP (termasuk kepekatan platelet lebih tinggi daripada nilai asas) kepada lebih daripada 1 × 10 6/µ L atau kira-kira 5 kali ganda kepekatan platelet minimum dalam platelet daripada garis dasar.Dalam tinjauan meluas oleh Fadadu et al.33 sistem dan protokol PRP telah dinilai.Kiraan platelet penyediaan PRP akhir yang dihasilkan oleh beberapa sistem ini adalah lebih rendah daripada keseluruhan darah.Mereka melaporkan bahawa faktor platelet PRP meningkat serendah 0.52 dengan kit putaran tunggal (Selphyl ®).Sebaliknya, putaran dua EmCyte Genesis PurePRPII ® Kepekatan platelet yang dihasilkan oleh peranti adalah yang tertinggi (1.6 × 10 6 /µL) .
Jelas sekali, kaedah in vitro dan haiwan bukanlah persekitaran penyelidikan yang ideal untuk transformasi yang berjaya menjadi amalan klinikal.Begitu juga, kajian perbandingan peranti tidak menyokong keputusan itu, kerana ia menunjukkan bahawa kepekatan platelet antara peranti PRP sangat berbeza.Nasib baik, melalui teknologi dan analisis berasaskan proteomik, kita boleh meningkatkan pemahaman kita tentang fungsi sel dalam PRP yang mempengaruhi keputusan rawatan.Sebelum mencapai konsensus mengenai penyediaan dan rumusan PRP piawai, PRP harus mengikut formulasi PRP klinikal untuk menggalakkan mekanisme pembaikan tisu yang besar dan keputusan klinikal yang progresif.
Formula PRP klinikal
Pada masa ini, PRP klinikal yang berkesan (C-PRP) telah dicirikan sebagai komposisi kompleks komponen multiselular autologous dalam plasma volum kecil yang diperoleh daripada sebahagian darah periferi selepas sentrifugasi.Selepas sentrifugasi, PRP dan komponen sel bukan plateletnya boleh dipulihkan daripada peranti kepekatan mengikut ketumpatan sel yang berbeza (di mana ketumpatan platelet adalah yang paling rendah).
Gunakan peralatan pemisahan ketumpatan sel PurePRP-SP ® (EmCyte Corporation, Fort Myers, FL, USA) telah digunakan untuk darah keseluruhan selepas dua prosedur sentrifugasi.Selepas proses sentrifugasi pertama, keseluruhan komponen darah dipisahkan kepada dua lapisan asas, penggantungan plasma platelet (lean) dan lapisan sel darah merah.Dalam A, langkah sentrifugasi kedua telah selesai.Jumlah PRP sebenar boleh diekstrak untuk aplikasi pesakit.Pembesaran dalam B menunjukkan bahawa terdapat lapisan coklat pemendapan eritrosit berbilang komponen yang teratur (diwakili oleh garis biru) di bahagian bawah peralatan, yang mengandungi kepekatan tinggi platelet, monosit dan limfosit, berdasarkan kecerunan ketumpatan.Dalam contoh ini, mengikut protokol penyediaan C-PRP dengan neutrofil yang lemah, peratusan minimum neutrofil (<0.3%) dan eritrosit (<0.1%) akan diekstrak.
Butiran platelet
Dalam aplikasi PRP klinikal awal, α- Granules adalah struktur dalaman platelet yang paling biasa disebut, kerana ia mengandungi faktor pembekuan, sejumlah besar PDGF dan pengawal selia angiogenik, tetapi mempunyai sedikit fungsi trombogenik.Faktor lain termasuk komponen kemokin dan sitokin yang kurang terkenal, seperti faktor platelet 4 (PF4), protein asas pra-platelet, P-selectin (pengaktif integrin) dan kemokin RANTES (dikawal melalui pengaktifan, mengekspresikan sel T normal dan mungkin rembesan).Fungsi keseluruhan komponen granul platelet khusus ini adalah untuk merekrut dan mengaktifkan sel imun lain atau mendorong keradangan sel endothelial.
Komponen berbutir padat seperti ADP, serotonin, polifosfat, histamin dan adrenalin lebih tersirat digunakan sebagai pengawal selia pengaktifan platelet dan trombosis.Paling penting, banyak unsur ini mempunyai fungsi mengubah suai sel imun.ADP platelet diiktiraf oleh reseptor P2Y12ADP pada sel dendritik (DC), dengan itu meningkatkan endositosis antigen.DC (sel pembentang antigen) sangat penting untuk memulakan tindak balas imun sel T dan mengawal tindak balas imun pelindung, yang menghubungkan sistem imun semula jadi dan sistem imun adaptif.Di samping itu, adenosin trifosfat (ATP) platelet menghantar isyarat melalui reseptor sel T P2X7, yang membawa kepada peningkatan pembezaan sel pembantu T CD4 kepada sel T helper 17 (Th17) proinflamasi.Komponen granul padat platelet lain (seperti glutamat dan serotonin) mendorong penghijrahan sel T dan meningkatkan pembezaan monosit kepada DC, masing-masing.Dalam PRP, imunomodulator yang berasal daripada zarah padat ini sangat diperkaya dan mempunyai fungsi imun yang besar.
Bilangan interaksi berpotensi langsung dan tidak langsung antara platelet dan sel (reseptor) lain adalah luas.Oleh itu, penggunaan PRP dalam persekitaran tisu patologi tempatan boleh menyebabkan pelbagai kesan keradangan.
Kepekatan platelet
C-PRP harus mengandungi dos klinikal platelet pekat untuk menghasilkan kesan terapeutik yang bermanfaat.Platelet dalam C-PRP harus merangsang percambahan sel, sintesis faktor mesenchymal dan neurotropik, menggalakkan penghijrahan sel chemotactic dan merangsang aktiviti imunoregulasi, seperti yang ditunjukkan dalam rajah.
Platelet yang diaktifkan, pembebasan PGF dan molekul lekatan menjadi pengantara pelbagai interaksi sel: kemotaksis, lekatan sel, penghijrahan dan pembezaan sel, dan mengawal selia aktiviti pengawalseliaan imun.Interaksi sel-sel platelet ini menyumbang kepada angiogenesis dan aktiviti keradangan, dan akhirnya merangsang proses pembaikan tisu.Singkatan: BMA: aspirasi sumsum tulang, EPC: sel progenitor endothelial, EC: sel endothelial, 5-HT: 5-hydroxytryptamine, RANTES: pengawalan diaktifkan ekspresi sel T normal dan rembesan putatif, JAM: jenis molekul lekatan simpang, CD40L: kelompok 40 ligan, SDF-1 α： Stromal cell-derived factor-1 α， CXCL: chemokine (CXC motif) ligan, PF4: platelet factor 4. Diadaptasi daripada Everts et al.
Marx adalah orang pertama yang membuktikan bahawa penyembuhan tulang dan tisu lembut telah dipertingkatkan, dan kiraan platelet minimum ialah 1 × 10 6 /µL. Keputusan ini disahkan dalam kajian gabungan lumbar melalui foramen intervertebral, apabila dos platelet lebih besar daripada 1.3 × Pada 106 platelet/µ L, kajian ini menunjukkan lebih gabungan.Di samping itu, Giusti et al.Didedahkan 1.5 × Mekanisme pembaikan tisu pada dos 109 memerlukan platelet/mL untuk mendorong angiogenesis berfungsi melalui aktiviti sel endothelial.Dalam kajian terakhir, kepekatan yang lebih tinggi mengurangkan potensi angiogenesis platelet dalam dan sekitar folikel.Di samping itu, data awal menunjukkan bahawa dos PRP juga akan mempengaruhi keputusan rawatan.Oleh itu, untuk mendorong tindak balas angiogenesis dengan ketara dan merangsang percambahan sel dan penghijrahan sel, C-PRP harus mengandungi sekurang-kurangnya 7.5 dalam botol rawatan PRP 5-mL × 10 9 boleh menghantar platelet.
Sebagai tambahan kepada pergantungan dos, kesan PRP pada aktiviti sel nampaknya sangat bergantung pada masa.Sophie et al.Keputusan ini menunjukkan bahawa pendedahan jangka pendek kepada lisat platelet manusia boleh merangsang percambahan sel tulang dan kemotaksis.Sebaliknya, pendedahan jangka panjang kepada PRP akan menyebabkan tahap alkali fosfatase dan pembentukan mineral yang lebih rendah.
sel darah merah
Sel darah merah bertanggungjawab untuk mengangkut oksigen ke tisu dan memindahkan karbon dioksida dari tisu ke paru-paru.Mereka tidak mempunyai nukleus dan terdiri daripada molekul heme yang mengikat protein.Komponen besi dan heme dalam sel darah merah menggalakkan gabungan oksigen dan karbon dioksida.Secara amnya, kitaran hidup sel darah merah adalah kira-kira 120 hari.Mereka dikeluarkan daripada peredaran oleh makrofaj melalui proses yang dipanggil penuaan RBC.Sel darah merah dalam sampel PRP mungkin rosak di bawah keadaan ricih (contohnya, pembedahan pendarahan darah keseluruhan, proses pengantara imun, tekanan oksidatif atau skema kepekatan PRP yang tidak mencukupi).Oleh itu, membran sel RBC terurai dan membebaskan hemoglobin (Hb) toksik, diukur dengan hemoglobin bebas plasma (PFH), heme dan besi.].PFH dan produk degradasinya (heme dan besi) bersama-sama membawa kepada kesan berbahaya dan sitotoksik pada tisu, membawa kepada tekanan oksidatif, kehilangan oksida nitrat, pengaktifan laluan keradangan dan imunosupresi.Kesan ini akhirnya akan membawa kepada disfungsi peredaran mikro, vasokonstriksi tempatan dan kecederaan vaskular, serta kerosakan tisu yang serius.
Perkara yang paling penting ialah apabila RBC yang mengandungi C-PRP dihantar ke tisu, ia akan menyebabkan tindak balas tempatan yang dipanggil eryptosis, yang akan mencetuskan pembebasan perencat migrasi sitokin dan makrofaj yang berkesan.Sitokin ini menghalang penghijrahan monosit dan makrofaj.Ia memberikan isyarat pro-radang yang kuat kepada tisu sekeliling, menghalang penghijrahan sel stem dan percambahan fibroblast, dan membawa kepada disfungsi sel tempatan yang ketara.Oleh itu, adalah penting untuk mengehadkan pencemaran RBC dalam penyediaan PRP.Di samping itu, peranan sel darah merah dalam penjanaan semula tisu tidak pernah ditentukan.Proses sentrifugasi dan penyediaan C-PRP yang mencukupi biasanya akan mengurangkan atau bahkan menghapuskan kehadiran sel darah merah, sekali gus mengelakkan akibat buruk hemolisis dan polisitemia.
Leukosit dalam C-PRP
Kehadiran sel darah putih dalam persediaan PRP bergantung pada peralatan rawatan dan skema penyediaan.Dalam peralatan PRP berasaskan plasma, sel darah putih dihapuskan sepenuhnya;Walau bagaimanapun, sel darah putih tertumpu dengan ketara dalam penyediaan PRP lapisan perang pemendapan eritrosit.Disebabkan oleh mekanisme pertahanan imun dan hosnya, sel darah putih sangat mempengaruhi biologi dalaman keadaan tisu akut dan kronik.Ciri-ciri ini akan dibincangkan lebih lanjut di bawah.Oleh itu, kehadiran leukosit tertentu dalam C-PRP boleh menyebabkan kesan selular dan tisu yang ketara.Lebih khusus lagi, sistem lapisan kuning coklat pemendapan eritrosit PRP yang berbeza menggunakan skema penyediaan yang berbeza, dengan itu menghasilkan bahagian neutrofil, limfosit dan monosit yang berbeza dalam PRP.Eosinofil dan basofil tidak boleh diukur dalam persediaan PRP kerana membran selnya terlalu rapuh untuk menahan daya pemprosesan emparan.
Neutrofil
Neutrofil adalah leukosit penting dalam banyak laluan penyembuhan.Laluan ini bergabung dengan protein antimikrob yang terdapat dalam platelet untuk membentuk penghalang padat terhadap patogen invasif.Kewujudan neutrofil ditentukan mengikut sasaran rawatan C-PRP.Peningkatan tahap keradangan tisu mungkin diperlukan dalam bioterapi PRP penjagaan luka kronik atau dalam aplikasi yang bertujuan untuk pertumbuhan atau penyembuhan tulang.Yang penting, fungsi neutrofil tambahan telah ditemui dalam beberapa model, menekankan peranan mereka dalam angiogenesis dan pembaikan tisu.Walau bagaimanapun, neutrofil juga boleh menyebabkan kesan berbahaya, jadi ia tidak sesuai untuk beberapa aplikasi.Zhou dan Wang membuktikan bahawa penggunaan PRP yang kaya dengan neutrofil boleh membawa kepada peningkatan nisbah kolagen jenis III kepada kolagen jenis I, sekali gus memburukkan lagi fibrosis dan mengurangkan kekuatan tendon.Ciri-ciri berbahaya lain yang dimediasi oleh neutrofil ialah pembebasan sitokin radang dan metalloproteinase matriks (MMPs), yang boleh menggalakkan keradangan dan katabolisme apabila digunakan pada tisu.
Leukomonosit
Dalam C-PRP, limfosit T dan B mononuklear lebih pekat daripada sel darah putih yang lain.Mereka berkait rapat dengan imuniti adaptif sitotoksik yang dimediasi sel.Limfosit boleh mencetuskan tindak balas sel untuk melawan jangkitan dan menyesuaikan diri dengan penceroboh.Di samping itu, sitokin terbitan T-limfosit (interferon- γ [IFN- γ] Dan interleukin-4 (IL-4) meningkatkan polarisasi makrofaj. Verassar et al. Dibuktikan bahawa limfosit T konvensional secara tidak langsung boleh menggalakkan penyembuhan tisu dalam model tetikus dengan mengawal selia pembezaan monosit dan makrofaj.
Monosit – sel pembaikan berbilang kuasa
Menurut peranti penyediaan PRP yang digunakan, monosit mungkin menonjol atau tidak wujud dalam botol rawatan PRP.Malangnya, prestasi dan keupayaan penjanaan semula mereka jarang dibincangkan dalam kesusasteraan.Oleh itu, sedikit perhatian diberikan kepada monosit dalam kaedah penyediaan atau formula akhir.Kumpulan monosit adalah heterogen, berasal dari sel progenitor dalam sumsum tulang, dan diangkut ke tisu periferi melalui laluan sel stem hematopoietik mengikut rangsangan persekitaran mikro.Semasa homeostasis dan keradangan, monosit yang beredar meninggalkan aliran darah dan direkrut ke tisu yang cedera atau terdegradasi.Mereka boleh bertindak sebagai makrofaj (M Φ) sel efektor atau sel progenitor.Monosit, makrofaj dan sel dendritik mewakili sistem fagositik mononuklear (MPS). Ciri tipikal MPS ialah keplastikan corak ekspresi gennya dan pertindihan fungsi antara jenis sel ini.Dalam tisu yang merosot, makrofaj pemastautin, faktor pertumbuhan yang bertindak tempatan, sitokin pro-radang, sel apoptosis atau nekrotik dan produk mikrob memulakan monosit untuk membezakan ke dalam kumpulan sel MPS.Katakan bahawa apabila C-PRP yang mengandungi monosit hasil tinggi disuntik ke dalam persekitaran mikro tempatan penyakit ini, monosit berkemungkinan akan membezakan kepada M Φ Untuk menyebabkan perubahan sel yang besar.
Daripada monosit kepada M Φ Dalam proses transformasi, M Φ Fenotip tertentu.Dalam sepuluh tahun yang lalu, model telah dibangunkan, yang mengintegrasikan M Φ Mekanisme pengaktifan kompleks digambarkan sebagai polarisasi dua keadaan bertentangan: M Φ Phenotype 1 (M Φ 1, Classic activation) dan M Φ Phenotype 2 (M Φ 2, pengaktifan alternatif).M Φ 1 dicirikan oleh rembesan sitokin radang (IFN-γ) Dan nitrik oksida untuk menghasilkan mekanisme membunuh patogen yang berkesan.M Φ Fenotip juga menghasilkan faktor pertumbuhan endothelial vaskular (VEGF) dan faktor pertumbuhan fibroblast (FGF).M Φ Fenotip terdiri daripada sel anti-radang dengan fagositosis tinggi.M Φ 2 Menghasilkan komponen matriks ekstraselular, angiogenesis dan kemokin, dan interleukin 10 (IL-10).Selain pertahanan patogen, M Φ Ia juga boleh mengurangkan keradangan dan menggalakkan pembaikan tisu.Perlu diperhatikan bahawa M Φ 2 telah dibahagikan kepada M in vitro Φ 2a、M Φ 2b dan M Φ 2. Ia bergantung kepada rangsangan.Terjemahan in vivo subtipe ini sukar kerana tisu mungkin mengandungi Kumpulan M Φ bercampur.Menariknya, berdasarkan isyarat persekitaran tempatan dan tahap IL-4, proinflamasi M Φ 1 boleh ditukar untuk menggalakkan pembaikan M Φ 2。 Daripada data ini, adalah munasabah untuk mengandaikan bahawa terdapat kepekatan tinggi monosit dan persediaan M Φ C-PRP. boleh menyumbang kepada pembaikan tisu yang lebih baik kerana mereka mempunyai pembaikan tisu anti-radang dan keupayaan transduksi isyarat sel.
Takrifan keliru bagi pecahan sel darah putih dalam PRP
Kehadiran sel darah putih dalam botol rawatan PRP bergantung pada peranti penyediaan PRP dan mungkin mempunyai perbezaan yang ketara.Terdapat banyak pertikaian tentang kewujudan leukosit dan sumbangannya kepada produk sub-PRP yang berbeza (seperti PRGF, P-PRP, LP-PRP, LR-PRP, P-PRF dan L-PRF) Dalam semakan baru-baru ini, enam rawak ujian terkawal (tahap bukti 1) dan tiga kajian perbandingan prospektif (tahap bukti 2) melibatkan 1055 pesakit, menunjukkan bahawa LR-PRP dan LP-PRP mempunyai keselamatan yang sama.Penulis membuat kesimpulan bahawa tindak balas buruk PRP mungkin tidak berkaitan secara langsung dengan kepekatan sel darah putih.Dalam kajian lain, LR-PRP tidak mengubah interleukin radang (IL-1) dalam lutut OA β、 IL-6, IL-8 dan IL-17).Keputusan ini menyokong pandangan bahawa peranan leukosit dalam aktiviti biologi PRP in vivo mungkin berasal dari crosstalk antara platelet dan leukosit.Interaksi ini boleh menggalakkan biosintesis faktor lain (seperti lipoksigen), yang boleh mengimbangi atau menggalakkan regresi keradangan.Selepas pelepasan awal molekul keradangan (asid arakidonik, leukotrien dan prostaglandin), lipoksigen A4 dibebaskan daripada platelet yang diaktifkan untuk menghalang pengaktifan neutrofil.Dalam persekitaran inilah M Φ Fenotip daripada M Φ 1 Bertukar kepada M Φ 2。 Di samping itu, terdapat peningkatan bukti bahawa sel mononuklear yang beredar boleh membezakan kepada pelbagai jenis sel bukan fagositik kerana pluripotensinya.
Jenis PRP akan mempengaruhi budaya MSC.Berbanding dengan sampel PRP atau PPP tulen, LR-PRP boleh mendorong percambahan MSC (BMMSCs) yang diperolehi sumsum tulang yang lebih tinggi, dengan pelepasan yang lebih cepat dan aktiviti biologi PGF yang lebih baik.Kesemua ciri ini adalah kondusif untuk menambah monosit ke dalam botol rawatan PRP dan mengiktiraf keupayaan imunomodulator dan potensi pembezaan mereka.
Peraturan imun kongenital dan adaptif PRP
Fungsi fisiologi platelet yang paling terkenal ialah mengawal pendarahan.Mereka terkumpul di tapak kerosakan tisu dan saluran darah yang rosak.Kejadian ini disebabkan oleh ekspresi integrin dan selektin yang merangsang lekatan dan pengagregatan platelet.Endothelium yang rosak memburukkan lagi proses ini, dan kolagen terdedah dan protein matriks subendothelial lain menggalakkan pengaktifan platelet yang mendalam.Dalam kes ini, peranan penting interaksi antara faktor von Willebrand (vWF) dan glikoprotein (GP), terutamanya GP-Ib, telah terbukti.Selepas pengaktifan platelet, platelet α-、 Padat, lisosom dan T-granul mengawal eksositosis dan melepaskan kandungannya ke dalam persekitaran ekstraselular.
Molekul lekatan platelet
Untuk lebih memahami peranan PRP dalam tisu radang dan platelet dalam tindak balas imun, kita harus memahami bagaimana reseptor permukaan platelet yang berbeza (integrin) dan molekul lekatan simpang (JAM) dan interaksi sel boleh memulakan proses kritikal dalam imuniti semula jadi dan adaptif.
Integrin ialah molekul lekatan permukaan sel yang terdapat dalam pelbagai jenis sel dan dinyatakan dalam kuantiti yang banyak pada platelet.Integrin termasuk a5b1, a6b1, a2b1 LFA-2, (GPIa/IIa) dan aIIbb3 (GPIIb/IIIa).Biasanya, mereka wujud dalam keadaan statik dan pertalian rendah.Selepas pengaktifan, mereka bertukar kepada keadaan pertalian mengikat ligan tinggi.Integrin mempunyai fungsi yang berbeza pada platelet dan mengambil bahagian dalam interaksi platelet dengan beberapa jenis sel darah putih, sel endothelial dan matriks ekstraselular.Di samping itu, kompleks GP-Ib-V-IX dinyatakan pada membran platelet dan merupakan reseptor utama untuk mengikat dengan von vWF.Interaksi ini mengantara hubungan awal antara platelet dan struktur subendothelial yang terdedah.Platelet integrin dan kompleks GP berkaitan dengan pelbagai proses keradangan dan memainkan peranan penting dalam pembentukan kompleks platelet-leukosit.Secara khusus, integrin aIIbb3 diperlukan untuk membentuk kompleks yang stabil dengan menggabungkan fibrinogen dengan reseptor antigen makrofaj 1 (Mac-1) pada neutrofil.
Platelet, neutrofil dan sel endothelial vaskular mengekspresikan molekul lekatan sel tertentu, dipanggil selectin.Di bawah keadaan keradangan, platelet mengekspresikan P-selectin dan neutrophil L-selectin.Selepas pengaktifan platelet, P-selectin boleh mengikat ligan PSGL-1 yang wujud pada neutrofil dan monosit.Di samping itu, pengikatan PSGL-1 memulakan tindak balas lata isyarat intraselular, yang mengaktifkan neutrofil melalui integrin neutrofil Mac-1 dan antigen berkaitan fungsi limfosit 1 (LFA-1).Mac-1 yang diaktifkan mengikat GPIb atau GPIIb/IIIa pada platelet melalui fibrinogen, dengan itu menstabilkan interaksi antara neutrofil dan platelet.Di samping itu, LFA-1 yang diaktifkan boleh bergabung dengan molekul lekatan antara sel platelet 2 untuk menstabilkan lagi kompleks neutrofil-platelet untuk menggalakkan lekatan jangka panjang dengan sel.
Platelet dan leukosit memainkan peranan penting dalam tindak balas imun semula jadi dan adaptif
Badan boleh mengenali badan asing dan tisu yang cedera dalam penyakit akut atau kronik untuk memulakan tindak balas lata penyembuhan luka dan laluan keradangan.Sistem imun semula jadi dan adaptif melindungi perumah daripada jangkitan, dan sel darah putih memainkan peranan penting dalam pertindihan antara kedua-dua sistem.Khususnya, monosit, makrofaj, neutrofil dan sel pembunuh semulajadi memainkan peranan penting dalam sistem semula jadi, manakala limfosit dan subsetnya memainkan peranan yang sama dalam sistem imun adaptif.
Interaksi platelet dan leukosit dalam interaksi sel imun semula jadi.Platelet berinteraksi dengan neutrofil dan monosit, dan akhirnya dengan M Φ Berinteraksi, menyesuaikan dan meningkatkan fungsi efektornya.Interaksi platelet-leukosit ini membawa kepada keradangan melalui mekanisme yang berbeza, termasuk NETosis.Singkatan: MPO: myeloperoxidase, ROS: spesies oksigen reaktif, TF: faktor tisu, BERSIH: perangkap ekstrasel neutrofil, NF- κ B: Faktor nuklear kappa B, M Φ： Makrofaj.
Sistem imun semula jadi
Peranan sistem imun semula jadi adalah untuk mengenal pasti mikroorganisma invasif atau serpihan tisu yang tidak spesifik dan merangsang pembersihannya.Apabila struktur molekul tertentu yang dipanggil reseptor pengecaman corak ekspresi permukaan (PRR) bergabung dengan corak molekul berkaitan patogen dan corak molekul berkaitan kerosakan, sistem imun semula jadi akan diaktifkan.Terdapat banyak jenis PRR, termasuk reseptor seperti Toll (TLR) dan reseptor seperti RIG-1 (RLR).Reseptor ini boleh mengaktifkan faktor transkripsi utama kappa B (NF- κ B) Ia juga mengawal pelbagai aspek tindak balas imun semula jadi dan adaptif.Menariknya, platelet juga mengekspresikan pelbagai molekul reseptor immunoregulatory pada permukaan dan sitoplasmanya, seperti P-selectin, ligan CD40 protein transmembran (CD40L), sitokin (seperti IL-1 β、 TGF- β） Dan TLR khusus platelet. Oleh itu, platelet boleh berinteraksi dengan pelbagai sel imun.
Interaksi platelet-sel putih dalam imuniti semula jadi
Apabila platelet memasuki atau menyerang aliran darah atau tisu, platelet adalah salah satu sel yang mengesan kecederaan endothelial dan patogen mikrob terlebih dahulu.Pengagregatan platelet dan menggalakkan pembebasan agonis platelet ADP, thrombin dan vWF, mengakibatkan pengaktifan platelet dan ekspresi reseptor kemokin platelet C, CC, CXC dan CX3C, sekali gus menyebabkan platelet di tapak yang dijangkiti atau kecederaan.
Sistem imun semula jadi ditentukan secara genetik untuk mengesan penceroboh, seperti virus, bakteria, parasit dan toksin, atau luka dan luka tisu.Ia adalah sistem yang tidak spesifik, kerana mana-mana patogen akan dikenal pasti sebagai asing atau bukan diri dan cepat ditemui.Sistem imun semula jadi bergantung pada satu set protein dan fagosit, yang mengiktiraf ciri-ciri patogen yang terpelihara dengan baik dan dengan cepat mengaktifkan tindak balas imun untuk membantu menghapuskan penceroboh, walaupun hos tidak pernah terdedah kepada patogen tertentu sebelum ini.
Neutrofil, monosit dan sel dendritik adalah sel imun semula jadi yang paling biasa dalam darah.Pengambilan mereka adalah perlu untuk tindak balas imun awal yang mencukupi.Apabila PRP digunakan dalam perubatan regeneratif, interaksi platelet-sel putih mengawal keradangan, penyembuhan luka dan pembaikan tisu.TLR-4 pada platelet merangsang interaksi platelet-neutrofil, yang mengawal letupan oksidatif leukosit yang dipanggil dengan mengawal pembebasan spesies oksigen reaktif (ROS) dan myeloperoxidase (MPO) daripada neutrofil.Di samping itu, interaksi antara platelet-neutrofil dan degranulasi neutrofil membawa kepada pembentukan perangkap neutrofil-ekstraselular (NETs).NETs terdiri daripada nukleus neutrofil dan kandungan intrasel neutrofil lain, yang boleh menangkap bakteria dan membunuhnya melalui NETosis.Pembentukan NETs adalah mekanisme pembunuhan penting neutrofil.
Selepas pengaktifan platelet, monosit boleh berhijrah ke tisu berpenyakit dan degeneratif, di mana mereka menjalankan aktiviti lekatan dan merembeskan molekul keradangan yang boleh mengubah sifat kemotaksis dan proteolitik.Di samping itu, platelet boleh mendorong pengaktifan NF- κ B monosit untuk mengawal fungsi effector monosit, yang merupakan pengantara utama tindak balas keradangan dan pengaktifan dan pembezaan sel imun.Platelet seterusnya menggalakkan letupan oksidatif endogen monosit untuk menggalakkan pemusnahan patogen fagosit.Pembebasan MPO dimediasi oleh interaksi langsung antara platelet-monosit CD40L-MAC-1.Menariknya, apabila P-selectin mengaktifkan platelet di bawah keadaan tisu radang akut dan kronik, kemokin yang berasal dari platelet PF4, RANTES, IL-1 β Dan CXCL-12 boleh menghalang apoptosis spontan monosit, tetapi menggalakkan pembezaan mereka kepada makrofaj.
Sistem imun adaptif
Selepas sistem imun semula jadi yang tidak spesifik mengenali kerosakan mikrob atau tisu, sistem imun adaptif khusus akan mengambil alih.Sistem penyesuaian termasuk limfosit B pengikat antigen (sel B) dan limfosit T konvensional (Treg) yang menyelaraskan pembersihan patogen.Sel T boleh dibahagikan secara kasar kepada sel T pembantu (sel Th) dan sel T sitotoksik (sel Tc, juga dikenali sebagai sel pembunuh T).Sel Th dibahagikan lagi kepada sel Th1, Th2 dan Th17, yang mempunyai fungsi utama dalam keradangan.Sel Th boleh merembeskan sitokin proinflamasi (cth IFN- γ、 TNF- β） Dan beberapa interleukin (cth, IL-17). Mereka amat berkesan dalam mencegah virus intraselular dan jangkitan bakteria. Sel Th merangsang percambahan dan pembezaan sel yang terlibat dalam tindak balas imun Sel Tc ialah sel efektor, yang boleh menghapuskan mikroorganisma dan sel intrasel dan ekstraselular yang disasarkan.
Menariknya, sel Th2 menghasilkan IL-4 dan memberi kesan kepada M Φ Polarisasi, M Φ Penjanaan semula berpandu M Φ 2 Fenotip, manakala IFN- γ M Φ Bertukar kepada M Φ 1 Fenotip radang, yang bergantung kepada dos dan masa sitokin.Selepas IL-4 diaktifkan, M Φ 2 mendorong sel Treg untuk membezakan ke dalam sel Th2, dan kemudian menghasilkan IL-4 tambahan (gelung maklum balas positif).Sel Th menukar M Φ Fenotip diarahkan kepada fenotip regeneratif sebagai tindak balas kepada agen biologi asal tisu.Mekanisme ini berdasarkan bukti bahawa sel Th memainkan peranan penting dalam mengawal keradangan dan pembaikan tisu.
Interaksi sel-sel putih platelet dalam imuniti adaptif
Sistem imun adaptif menggunakan reseptor khusus antigen dan mengingati patogen yang ditemui sebelum ini, dan memusnahkannya apabila ia kemudiannya bertemu dengan perumah.Walau bagaimanapun, tindak balas imun adaptif ini berkembang dengan perlahan.Konias et al.Ia menunjukkan bahawa komponen platelet menyumbang kepada persepsi risiko dan pembaikan tisu, dan bahawa interaksi antara platelet dan leukosit menggalakkan pengaktifan tindak balas imun adaptif.
Semasa tindak balas imun adaptif, platelet menggalakkan tindak balas monosit dan makrofaj melalui pematangan sel DC dan NK, yang membawa kepada tindak balas sel T dan sel B tertentu.Oleh itu, komponen granul platelet secara langsung mempengaruhi imuniti adaptif dengan menyatakan CD40L, molekul yang penting untuk mengawal tindak balas imun adaptif.Platelet melalui CD40L bukan sahaja memainkan peranan dalam persembahan antigen, tetapi juga mempengaruhi tindak balas sel T.Liu et al.Telah didapati bahawa platelet mengawal tindak balas sel T CD4 dengan cara yang kompleks.Peraturan pembezaan subset sel CD4 T ini bermakna platelet menggalakkan sel CD4 T untuk bertindak balas kepada rangsangan keradangan, sekali gus menghasilkan tindak balas pro-radang dan anti-radang yang kuat.
Platelet juga mengawal tindak balas penyesuaian yang dimediasi sel B kepada patogen mikrob.Adalah diketahui umum bahawa CD40L pada sel CD4 T yang diaktifkan akan mencetuskan CD40 sel B, memberikan isyarat kedua yang diperlukan untuk pengaktifan limfosit B yang bergantung kepada sel T, penukaran allotype berikutnya, dan pembezaan dan percambahan sel B.Secara umum, keputusan dengan jelas menunjukkan pelbagai fungsi platelet dalam imuniti adaptif, menunjukkan bahawa platelet menyambung interaksi antara sel T dan sel B melalui CD40-CD40L, sekali gus meningkatkan tindak balas sel B yang bergantung kepada sel T.Di samping itu, platelet kaya dengan reseptor permukaan sel, yang boleh menggalakkan pengaktifan platelet dan melepaskan sejumlah besar molekul aktif keradangan dan biologi yang disimpan dalam zarah platelet yang berbeza, sekali gus menjejaskan tindak balas imun semula jadi dan adaptif.
Peranan diperluaskan serotonin yang diperoleh daripada platelet dalam PRP
Serotonin (5-hydroxytryptamine, 5-HT) mempunyai peranan penting yang jelas dalam sistem saraf pusat (CNS), termasuk toleransi kesakitan.Dianggarkan kebanyakan 5-HT manusia dihasilkan dalam saluran gastrousus dan kemudian melalui peredaran darah, di mana ia diserap oleh platelet melalui pengangkut pengambilan semula serotonin dan disimpan dalam zarah padat pada kepekatan tinggi (65 mmol/L).5-HT ialah neurotransmitter dan hormon terkenal yang membantu mengawal pelbagai proses neuropsikologi dalam CNS (pusat 5-HT).Walau bagaimanapun, kebanyakan 5-HT wujud di luar CNS (periferal 5-HT), dan ia terlibat dalam mengawal selia fungsi biologi sistemik dan selular pelbagai sistem organ, termasuk sistem fungsi kardiovaskular, paru-paru, gastrousus, urogenital dan platelet.5-HT mempunyai metabolisme yang bergantung kepada kepekatan pada pelbagai jenis sel, termasuk adiposit, sel epitelium dan sel darah putih.Periferal 5-HT juga merupakan modulator imun yang kuat, yang boleh merangsang atau menghalang keradangan dan menjejaskan pelbagai sel imun melalui reseptor 5-HT tertentu (5HTR).
Paracrine dan mekanisme autokrin HT
Aktiviti 5-HT dimediasi oleh interaksinya dengan 5HTR, yang merupakan superfamili dengan tujuh ahli (5-HT 1 – 7) dan sekurang-kurangnya 14 subtipe reseptor yang berbeza, termasuk ahli 5-HT 7 yang ditemui baru-baru ini, persisian dan berfungsi dalam pengurusan kesakitan.Dalam proses degranulasi platelet, platelet yang diaktifkan merembeskan sejumlah besar 5-HT yang berasal dari platelet, yang boleh menggalakkan penguncupan vaskular dan merangsang pengaktifan platelet dan limfosit bersebelahan melalui ekspresi 5-HTR pada sel endothelial, sel otot licin dan sel imun.Pacala et al.Kesan mitosis 5-HT pada sel endothelial vaskular telah dikaji, dan potensi menggalakkan pertumbuhan saluran darah yang rosak dengan merangsang angiogenesis telah ditentukan.Cara proses ini dikawal tidak sepenuhnya jelas, tetapi ia mungkin melibatkan laluan isyarat dua hala yang berbeza dalam litar mikro tisu untuk mengawal selia fungsi sel endothelial vaskular dan sel otot licin, fibroblas dan sel imun melalui reseptor 5-HT khusus pada sel ini .Fungsi autokrin platelet 5-HT selepas pengaktifan platelet telah diterangkan [REF].Pembebasan 5-HT meningkatkan pengaktifan platelet dan pengambilan platelet yang beredar, membawa kepada pengaktifan tindak balas lata isyarat dan efektor huluan yang menyokong kereaktifan platelet.
Kesan imunomodulator 5-HT
Semakin banyak bukti menunjukkan bahawa serotonin boleh memainkan peranan dalam 5HTR yang berbeza sebagai modulator imun.Menurut 5HTR yang dinyatakan dalam pelbagai leukosit yang terlibat dalam tindak balas keradangan, 5-HT yang diperolehi platelet bertindak sebagai pengawal selia imun dalam kedua-dua sistem imun semula jadi dan adaptif.5-HT boleh merangsang pembiakan Treg dan mengawal fungsi sel B, sel pembunuh semulajadi dan neutrofil dengan merekrut DC dan monosit ke tapak keradangan.Kajian terkini menunjukkan bahawa 5-HT yang diperolehi platelet boleh mengawal fungsi sel imun dalam keadaan tertentu.Oleh itu, dengan menggunakan C-PRP, kepekatan platelet yang lebih besar daripada 1 × 10 6/µ L dengan ketara boleh membantu mengangkut kepekatan 5-HT yang diperoleh daripada platelet besar ke tisu.Dalam persekitaran mikro yang dicirikan oleh komponen keradangan, PRP boleh berinteraksi dengan beberapa sel imun yang memainkan peranan penting dalam patologi ini, yang mungkin menjejaskan keputusan klinikal.
Rajah yang memaparkan tindak balas 5-HT pelbagai rupa selepas pengaktifan platelet PRP radang.Selepas pengaktifan platelet, platelet melepaskan butirannya, termasuk 5-HT dalam butiran padat, yang mempunyai pelbagai kesan pembezaan pada pelbagai sel imun, sel endothelial dan sel otot licin.Singkatan: SMC: sel otot licin, EC: sel endothelial, Treg: limfosit T konvensional, M Φ： Makrofaj, DC: sel dendritik, IL: interleukin, IFN- γ： Interferon γ。 Diubah suai dan disesuaikan daripada Everts et al.dan Hull et al.
Kesan analgesik PRP
Platlet yang diaktifkan akan mengeluarkan banyak mediator pro-radang dan anti-radang, yang bukan sahaja boleh menyebabkan kesakitan, tetapi juga mengurangkan keradangan dan kesakitan.Sebaik sahaja digunakan, dinamik platelet biasa PRP mengubah persekitaran mikro sebelum pembaikan dan penjanaan semula tisu melalui pelbagai laluan kompleks yang berkaitan dengan anabolisme dan katabolisme, percambahan sel, pembezaan dan pengawalan sel stem.Ciri-ciri PRP ini membawa kepada penggunaan PRP dalam pelbagai keadaan patologi klinikal yang biasanya dikaitkan dengan kesakitan kronik (seperti kecederaan sukan, penyakit ortopedik, penyakit tulang belakang dan luka kronik yang kompleks), walaupun mekanisme yang tepat belum ditentukan sepenuhnya.
Pada tahun 2008, Evertz et al.Ia adalah percubaan terkawal rawak pertama untuk melaporkan kesan analgesik penyediaan PRP, yang disediakan daripada lapisan coklat kadar pemendapan eritrosit autologous dan diaktifkan dengan trombin autologous selepas pembedahan bahu.Mereka mencatatkan pengurangan ketara dalam skor skala analog visual, penggunaan analgesik berasaskan opioid, dan pemulihan pasca operasi yang lebih berjaya.Perlu diperhatikan bahawa mereka mencerminkan kesan analgesik platelet yang diaktifkan dan membuat spekulasi mengenai mekanisme platelet yang melepaskan 5-HT.Ringkasnya, platelet tidak aktif dalam PRP yang baru disediakan.Selepas pengaktifan platelet secara langsung atau tidak langsung (faktor tisu), platelet berubah bentuk dan menghasilkan cukup palsu untuk menggalakkan pengagregatan platelet.Kemudian, mereka melepaskan α- Dan zarah padat intrasel.Tisu yang dirawat dengan PRP diaktifkan akan diserang oleh PGF, sitokin dan lisosom platelet lain.Lebih khusus lagi, apabila zarah padat melepaskan kandungannya, ia akan mengeluarkan sejumlah besar 5-HT yang mengawal rasa sakit.Dalam C-PRP, kepekatan platelet adalah 5 hingga 7 kali lebih tinggi daripada dalam darah periferi.Oleh itu, pembebasan 5-HT daripada platelet adalah astronomi.Menariknya, Sprott et al.Laporan itu memerhatikan bahawa kesakitan telah lega dengan ketara selepas akupunktur dan moksibusi, kepekatan platelet yang diperolehi 5-HT telah dikurangkan dengan ketara, dan kemudian tahap plasma 5-HT telah meningkat.
Dalam periferal, platelet, sel mast dan sel endothelial akan melepaskan 5-HT endogen semasa kecederaan tisu atau trauma pembedahan.Menariknya, pelbagai reseptor 5-HT neuron dikesan di kawasan persisian, yang mengesahkan bahawa 5-HT boleh mengganggu penghantaran nociceptive di kawasan persisian.Kajian ini menunjukkan bahawa 5-HT boleh menjejaskan penghantaran nociceptive tisu periferi melalui reseptor 5-HT1, 5-HT2, 5-HT3, 5-HT4 dan 5-HT7.
Sistem 5-HT mewakili sistem berkuasa yang boleh mengurangkan dan meningkatkan tahap kesakitan selepas rangsangan berbahaya.Peraturan pusat dan periferi bagi isyarat nociceptive dan perubahan dalam sistem 5-HT telah dilaporkan pada pesakit yang mengalami kesakitan kronik.Dalam tahun-tahun kebelakangan ini, sebilangan besar kajian telah memberi tumpuan kepada peranan 5-HT dan reseptor masing-masing dalam memproses dan mengawal selia maklumat berbahaya, mengakibatkan ubat-ubatan seperti selektif serotonin reuptake inhibitors (SSRI).Ubat ini menghalang pengambilan semula serotonin ke dalam neuron presinaptik selepas pembebasan serotonin.Ia menjejaskan tempoh dan intensiti komunikasi serotonin dan merupakan rawatan alternatif untuk sakit kronik.Penyelidikan klinikal lanjut diperlukan untuk memahami dengan jelas mekanisme molekul peraturan kesakitan 5-HT yang berasal dari PRP dalam penyakit kronik dan degeneratif.
Data lain untuk menyelesaikan potensi kesan analgesik PRP boleh diperolehi selepas ujian model haiwan analgesik.Kesimpulan statistik perbandingan dalam model ini adalah mencabar kerana kajian ini mengandungi terlalu banyak pembolehubah.Walau bagaimanapun, beberapa kajian klinikal telah menangani kesan nociceptive dan analgesik PRP.Beberapa kajian telah menunjukkan bahawa pesakit yang menerima rawatan untuk tendinosis atau rotator cuff tears mempunyai sedikit kelegaan kesakitan.Sebaliknya, beberapa kajian lain telah menunjukkan bahawa PRP boleh mengurangkan atau bahkan menghilangkan kesakitan pesakit dengan degenerasi tendon, OA, plantar fasciitis dan penyakit kaki dan buku lali yang lain.Kepekatan platelet akhir dan komposisi sel biologi telah dikenal pasti sebagai ciri PRP utama, yang membantu untuk melihat kesan analgesik yang konsisten selepas penggunaan PRP.Pembolehubah lain termasuk kaedah penghantaran PRP, teknologi aplikasi, protokol pengaktifan platelet, tahap aktiviti biologi PGF dan sitokin yang dikeluarkan, jenis tisu aplikasi PRP dan jenis kecederaan.
Perlu diperhatikan bahawa Kuffler menyelesaikan potensi PRP dalam mengurangkan kesakitan pada pesakit dengan sakit neuropatik kronik yang ringan hingga teruk, sekunder kepada saraf bukan regeneratif yang rosak.Tujuan kajian ini adalah untuk menyiasat sama ada kesakitan neuropatik boleh dikurangkan atau reda disebabkan oleh PRP menggalakkan penjanaan semula akson dan pemuliharaan semula saraf sasaran.Anehnya, dalam kalangan pesakit yang menerima rawatan, sakit neuropatik masih dihapuskan atau dikurangkan sekurang-kurangnya enam tahun selepas pembedahan.Di samping itu, semua pesakit mula melegakan kesakitan dalam tempoh tiga minggu selepas penggunaan PRP.
Baru-baru ini, kesan PRP analgesik yang serupa telah diperhatikan dalam bidang luka pasca operasi dan penjagaan kulit.Menariknya, penulis melaporkan aspek fisiologi kesakitan luka yang berkaitan dengan kecederaan vaskular dan hipoksia tisu kulit.Mereka juga membincangkan kepentingan angiogenesis dalam mengoptimumkan pengoksigenan dan penghantaran nutrien.Kajian mereka menunjukkan bahawa berbanding dengan kumpulan kawalan, pesakit yang menerima rawatan PRP mempunyai kesakitan yang kurang dan peningkatan angiogenesis dengan ketara.Akhirnya, Johal dan rakan-rakannya menjalankan kajian sistematik dan meta-analisis dan membuat kesimpulan bahawa PRP boleh mengurangkan kesakitan selepas menggunakan PRP dalam indikasi ortopedik, terutamanya pada pesakit yang menerima rawatan epicondylitis luaran dan OA lutut.Malangnya, kajian ini tidak menyatakan kesan sel darah putih, kepekatan platelet atau penggunaan pengaktif platelet eksogen, kerana pembolehubah ini akan menjejaskan keberkesanan keseluruhan PRP.Kepekatan platelet PRP yang optimum untuk melegakan kesakitan maksimum tidak jelas.Dalam model tikus tendinosis, kepekatan platelet adalah 1.0 × 10 6 / μ Pada L, rasa sakit boleh lega sepenuhnya, manakala pelepasan sakit yang disebabkan oleh PRP dengan separuh daripada kepekatan platelet berkurangan dengan ketara.Oleh itu, kami menggalakkan lebih banyak kajian klinikal untuk menyiasat kesan analgesik bagi persediaan PRP yang berbeza.
PRP dan kesan angiogenesis
Persediaan C-PRP dalam perubatan regeneratif yang tepat membolehkan penghantaran biomolekul yang dikeluarkan oleh kepekatan tinggi platelet yang diaktifkan di tapak tisu sasaran.Oleh itu, pelbagai tindak balas lata telah dimulakan, yang menyumbang kepada peraturan imun di tapak, proses keradangan dan angiogenesis untuk menggalakkan penyembuhan dan pembaikan tisu.
Angiogenesis ialah proses pelbagai langkah dinamik yang melibatkan percambahan dan saluran mikro tisu daripada saluran darah sedia ada.Angiogenesis telah berkembang disebabkan oleh pelbagai mekanisme biologi, termasuk penghijrahan sel endothelial, percambahan, pembezaan dan pembahagian.Proses selular ini adalah prasyarat untuk pembentukan saluran darah baru.Mereka adalah penting untuk pertumbuhan saluran darah sedia ada untuk memulihkan aliran darah dan menyokong aktiviti metabolik yang tinggi untuk pembaikan tisu dan penjanaan semula tisu.Salur darah baru ini membolehkan penghantaran oksigen dan nutrien, dan penyingkiran produk sampingan daripada tisu yang dirawat.
Aktiviti angiogenesis dikawal dengan merangsang faktor angiogenik VEGF dan faktor anti-angiogenik (cth, angiostatin dan trombospondin-1 [TSP-1]).Dalam persekitaran mikro yang berpenyakit dan terdegradasi (termasuk ketegangan oksigen rendah, pH rendah dan tahap asid laktik yang tinggi), faktor angiogenik tempatan akan memulihkan aktiviti angiogenesis.
Beberapa media larut platelet, seperti FGF asas dan TGF- β Dan VEGF boleh merangsang sel endothelial untuk menghasilkan saluran darah baru.Landsdown dan Fortier melaporkan pelbagai hasil yang berkaitan dengan komposisi PRP, termasuk sumber intraplatelet banyak pengawal selia angiogenik.Di samping itu, mereka membuat kesimpulan bahawa peningkatan angiogenesis menyumbang kepada penyembuhan penyakit MSK di kawasan yang mempunyai vaskularisasi yang lemah, seperti koyakan meniskus, kecederaan tendon dan kawasan lain dengan vaskularisasi yang lemah.
Menggalakkan dan sifat platelet anti-angiogenik
Dalam beberapa dekad yang lalu, kajian yang diterbitkan telah membuktikan bahawa platelet memainkan peranan penting dalam hemostasis primer, pembentukan bekuan, faktor pertumbuhan dan pembebasan sitokin, dan peraturan angiogenesis sebagai sebahagian daripada proses pembaikan tisu.Secara paradoks, PRP α- Butiran mengandungi senjata faktor pertumbuhan pro-angiogenik, protein anti-angiogenik dan sitokin (seperti PF4, plasminogen activator inhibitor-1 dan TSP-1), dan menyasarkan pembebasan faktor tertentu yang memainkan peranan. .Peranan dalam angiogenesis.Oleh itu, peranan PRP dalam mengawal peraturan angiogenesis boleh ditakrifkan oleh pengaktifan reseptor permukaan sel tertentu, TGF- β Memulakan tindak balas pro-angiogenik dan anti-angiogenik.Keupayaan platelet untuk menjalankan laluan angiogenesis telah disahkan dalam angiogenesis patologi dan angiogenesis tumor.
Faktor pertumbuhan angiogenik yang berasal dari platelet dan faktor pertumbuhan anti-angiogenik, berasal daripada molekul α- Dan padat dan pelekat.Paling penting, diterima umum bahawa kesan keseluruhan platelet pada angiogenesis adalah pro-angiogenik dan merangsang.Terapi PRP dijangka akan mengawal induksi angiogenesis, yang akan menyumbang kepada kesan rawatan banyak penyakit, seperti penyembuhan luka dan pembaikan tisu.Pentadbiran PRP, lebih khusus pentadbiran PGF berkepekatan tinggi dan sitokin platelet lain, boleh mendorong angiogenesis, angiogenesis dan arteriogenesis, kerana faktor 1a yang berasal dari sel stromal mengikat kepada reseptor CXCR4 pada sel progenitor endothelial.Bill et al.Adalah dicadangkan bahawa PRP meningkatkan neovaskularisasi iskemik, yang mungkin disebabkan oleh rangsangan angiogenesis, angiogenesis dan arteriogenesis.Dalam model in vitro mereka, percambahan sel endothelial dan pembentukan kapilari telah diinduksi oleh sejumlah besar PDG yang berbeza, di mana VEGF adalah perangsang angiogenik utama.Satu lagi faktor penting dan penting untuk memulihkan laluan angiogenesis ialah sinergi antara pelbagai PGF.Richardson et al.Telah dibuktikan bahawa aktiviti sinergistik faktor angiogenik platelet-derived growth factor-bb (PDGF-BB) dan VEGF membawa kepada pembentukan pesat rangkaian vaskular matang berbanding dengan aktiviti faktor pertumbuhan individu.Kesan gabungan faktor-faktor ini baru-baru ini disahkan dalam kajian mengenai peningkatan peredaran cagaran serebrum pada tikus dengan hipoperfusi jangka panjang.
Paling penting, kajian in vitro mengukur kesan proliferatif sel endothelial vena umbilical manusia dan pelbagai kepekatan platelet pada pemilihan peranti penyediaan PRP dan strategi dos platelet, dan keputusan menunjukkan bahawa dos platelet optimum ialah 1.5 × 10 6 platelet/ μ 50. Untuk menggalakkan angiogenesis.Kepekatan platelet yang terlalu tinggi boleh menghalang proses angiogenesis, jadi kesannya lemah.
Penuaan sel, penuaan dan PRP
Penuaan sel boleh disebabkan oleh pelbagai rangsangan.Ini adalah proses di mana sel berhenti membahagi dan menjalani perubahan fenotip yang unik untuk menghalang pertumbuhan sel yang rosak tanpa had, yang memainkan peranan penting dalam pencegahan kanser.Dalam proses penuaan fisiologi, penuaan replikasi sel juga akan menggalakkan penuaan sel, dan keupayaan penjanaan semula MSC akan berkurangan.
Kesan penuaan dan penuaan sel
Dalam vivo, banyak jenis sel akan menua dan terkumpul dalam pelbagai tisu semasa penuaan, antaranya terdapat sejumlah besar sel penuaan.Pengumpulan sel-sel penuaan nampaknya meningkat dengan peningkatan usia, kerosakan sistem imun, kerosakan tisu atau faktor yang berkaitan dengan tekanan.Mekanisme penuaan selular telah dikenal pasti sebagai faktor patogenik penyakit berkaitan usia, seperti osteoarthritis, osteoporosis dan degenerasi cakera intervertebral.Pelbagai rangsangan akan memburukkan lagi penuaan sel.Sebagai tindak balas, fenotip rembesan berkaitan penuaan (SASP) akan merembeskan kepekatan tinggi sel protein dan sitokin.Fenotip istimewa ini berkaitan dengan sel-sel penuaan, di mana ia merembeskan tahap sitokin keradangan yang tinggi (seperti IL-1, IL-6, IL-8), faktor pertumbuhan (seperti TGF- β 、 HGF, VEGF, PDGF), MMP, dan cathepsin.Berbanding dengan orang muda, SAPS telah terbukti meningkat dengan usia, kerana proses keadaan mantap dimusnahkan, mengakibatkan penuaan sel dan mengurangkan keupayaan penjanaan semula.Khususnya, dalam penyakit sendi dan penyakit otot rangka.Dalam hal ini, penuaan imun dianggap sebagai perubahan ketara dalam spektrum rembesan sel imun, menunjukkan bahawa kepekatan TNF-a, IL-6 dan/atau Il-1b meningkat, yang membawa kepada keradangan kronik gred rendah.Perlu diingat bahawa disfungsi sel stem juga berkaitan dengan mekanisme autonomi bukan selular, seperti sel penuaan, terutamanya pengeluaran faktor pro-radang dan anti-regeneratif melalui SASP.
Sebaliknya, SASP juga boleh merangsang keplastikan sel dan pengaturcaraan semula sel bersebelahan.Di samping itu, SASP boleh mengatur komunikasi dengan pelbagai mediator imun dan mengaktifkan sel imun untuk menggalakkan pembersihan sel penuaan.Memahami peranan dan fungsi sel penuaan akan menyumbang kepada penyembuhan dan pembentukan semula tisu otot MSK dan luka kronik.
Perlu diperhatikan bahawa Ritcka et al.Kajian meluas telah dijalankan, dan peranan utama dan bermanfaat SASP dalam menggalakkan keplastikan sel dan penjanaan semula tisu telah ditemui, dan konsep penghantaran rawatan sementara sel-sel penuaan telah diperkenalkan.Mereka dengan berhati-hati menyebut bahawa penuaan adalah terutamanya proses yang bermanfaat dan regeneratif.
Penuaan sel dan potensi PRP
Apabila bilangan sel stem berkurangan, penuaan akan menjejaskan prestasi sel stem.Begitu juga, pada manusia, ciri-ciri sel stem (seperti kekeringan, percambahan dan pembezaan) juga berkurangan dengan usia.Wang dan Nirmala melaporkan bahawa penuaan akan mengurangkan ciri-ciri sel stem sel tendon dan bilangan reseptor faktor pertumbuhan.Kajian haiwan menunjukkan bahawa kepekatan PDGF dalam kuda muda adalah tinggi.Mereka membuat kesimpulan bahawa peningkatan bilangan reseptor GF dan bilangan GF pada individu muda mungkin mempunyai tindak balas selular yang lebih baik terhadap rawatan PRP berbanding individu yang lebih tua dalam individu muda.Penemuan ini mendedahkan mengapa rawatan PRP mungkin kurang berkesan atau bahkan tidak berkesan pada pesakit tua dengan sel stem yang lebih sedikit dan "kualiti buruk".Telah terbukti bahawa proses penuaan rawan penuaan diterbalikkan dan tempoh rehat kondrosit meningkat selepas suntikan PRP.Jia et al.Ia digunakan untuk mengkaji fibroblas dermal tikus secara in vitro photoaging, dengan dan tanpa rawatan PRP, untuk menjelaskan mekanisme tindak balas PGF dalam model ini.Kumpulan PRP menunjukkan kesan langsung pada matriks ekstraselular, peningkatan kolagen jenis I dan mengurangkan sintesis metalloproteinase, menunjukkan bahawa PRP boleh mengatasi penuaan sel, dan juga dalam penyakit MSK degeneratif.
Dalam kajian lain, PRP digunakan untuk mengumpul sel stem sumsum tulang tua daripada tikus tua.Telah ditentukan bahawa PRP boleh memulihkan pelbagai fungsi sel stem daripada penuaan, seperti percambahan sel dan pembentukan koloni, dan membina semula penanda yang berkaitan dengan penuaan sel.
Baru-baru ini, Oberlohr dan rakan-rakannya mengkaji secara meluas peranan penuaan sel dalam melemahkan pertumbuhan semula otot, dan menilai PRP dan plasma miskin platelet (PPP) sebagai pilihan rawatan biologi untuk pembaikan otot rangka.Mereka membayangkan bahawa rawatan PRP atau PPP untuk pembaikan otot rangka akan berdasarkan faktor biologi yang disesuaikan untuk penanda sel khusus SASP dan faktor lain yang membawa kepada perkembangan fibrosis.
Adalah munasabah untuk mempercayai bahawa sebelum penggunaan PRP, penuaan sel yang disasarkan boleh meningkatkan ciri penjanaan semula keberkesanan rawatan biologi dengan mengurangkan faktor SASP tempatan.Telah dicadangkan bahawa pilihan lain untuk menambah baik hasil rawatan PRP dan PPP untuk penjanaan semula otot rangka adalah dengan secara selektif membuang sel-sel penuaan dengan penghapus penuaan.Tidak dinafikan bahawa hasil penyelidikan baru-baru ini mengenai kesan PRP pada penuaan dan penuaan sel adalah menarik, tetapi ia masih di peringkat awal.Oleh itu, adalah tidak munasabah untuk membuat sebarang cadangan pada masa ini.
（Kandungan artikel ini dicetak semula, dan kami tidak memberikan sebarang jaminan nyata atau tersirat untuk ketepatan, kebolehpercayaan atau kesempurnaan kandungan yang terkandung dalam artikel ini, dan tidak bertanggungjawab terhadap pendapat artikel ini, sila faham.）
Masa siaran: Mac-01-2023