Terapi sel autologous yang baru muncul menggunakan plasma kaya platelet (PRP) mungkin memainkan peranan tambahan dalam pelbagai pelan rawatan ubat regeneratif.Terdapat permintaan global yang tidak dipenuhi untuk strategi pembaikan tisu untuk merawat pesakit dengan penyakit muskuloskeletal (MSK) dan tulang belakang, osteoarthritis (OA) dan luka kompleks dan refraktori kronik.Terapi PRP adalah berdasarkan fakta bahawa faktor pertumbuhan platelet (PGF) menyokong penyembuhan luka dan lata pembaikan (keradangan, percambahan dan pembentukan semula).Beberapa formulasi PRP yang berbeza telah dinilai daripada kajian manusia, in vitro dan haiwan.Walau bagaimanapun, cadangan kajian in vitro dan haiwan biasanya membawa kepada keputusan klinikal yang berbeza, kerana sukar untuk menterjemah hasil penyelidikan bukan klinikal dan cadangan kaedah ke dalam rawatan klinikal manusia.Dalam beberapa tahun kebelakangan ini, kemajuan telah dicapai dalam memahami konsep teknologi PRP dan agen biologi, dan arahan penyelidikan baharu serta petunjuk baharu telah dicadangkan.Dalam ulasan ini, kami akan membincangkan kemajuan terkini dalam penyediaan dan komposisi PRP, termasuk dos platelet, aktiviti leukosit dan peraturan imun semula jadi dan adaptif, kesan 5-hydroxytryptamine (5-HT) dan melegakan kesakitan.Di samping itu, kami membincangkan mekanisme PRP yang berkaitan dengan keradangan dan angiogenesis semasa pembaikan dan penjanaan semula tisu.Akhir sekali, kami akan mengkaji kesan beberapa ubat pada aktiviti PRP.
Plasma kaya platelet autologous (PRP) ialah bahagian cecair darah periferal autologous selepas rawatan, dan kepekatan platelet lebih tinggi daripada garis dasar.Terapi PRP telah digunakan untuk pelbagai petunjuk selama lebih daripada 30 tahun, menyebabkan minat yang besar terhadap potensi PRP autogenous dalam perubatan regeneratif.Istilah ejen biologi ortopedik baru-baru ini telah diperkenalkan untuk merawat penyakit muskuloskeletal (MSK), dan telah mencapai hasil yang menjanjikan dalam keupayaan penjanaan semula campuran sel PRP bioaktif heterogen.Pada masa ini, terapi PRP adalah pilihan rawatan yang sesuai dengan faedah klinikal, dan keputusan pesakit yang dilaporkan adalah menggalakkan.Walau bagaimanapun, ketidakkonsistenan keputusan pesakit dan pandangan baharu telah menimbulkan cabaran kepada kebolehpraktisan aplikasi klinikal PRP.Salah satu sebabnya mungkin bilangan dan kebolehubahan sistem PRP dan jenis PRP di pasaran.Peranti ini berbeza dari segi jumlah kutipan PRP dan skema penyediaan, menghasilkan ciri PRP yang unik dan agen biologi.Di samping itu, kekurangan konsensus mengenai penyeragaman skim penyediaan PRP dan laporan penuh agen biologi dalam aplikasi klinikal membawa kepada keputusan laporan yang tidak konsisten.Banyak percubaan telah dibuat untuk mencirikan dan mengklasifikasikan PRP atau produk terbitan darah dalam aplikasi perubatan regeneratif.Di samping itu, derivatif platelet, seperti lisat platelet manusia, telah dicadangkan untuk penyelidikan sel stem ortopedik dan in vitro.
Salah satu komen pertama mengenai PRP telah diterbitkan pada tahun 2006. Fokus utama kajian ini ialah fungsi dan cara tindakan platelet, kesan PRP pada setiap peringkat lata penyembuhan, dan peranan teras faktor pertumbuhan yang diperolehi platelet. dalam pelbagai petunjuk PRP.Pada peringkat awal penyelidikan PRP, minat utama dalam PRP atau PRP-gel adalah kewujudan dan fungsi khusus beberapa faktor pertumbuhan platelet (PGF).
Dalam makalah ini, kami akan membincangkan secara meluas perkembangan terkini struktur zarah PRP yang berbeza dan reseptor membran sel platelet dan kesannya terhadap peraturan imun sistem imun semula jadi dan adaptif.Di samping itu, peranan sel individu yang mungkin wujud dalam botol rawatan PRP dan pengaruhnya terhadap proses penjanaan semula tisu akan dibincangkan secara terperinci.Di samping itu, kemajuan terkini dalam memahami ejen biologi PRP, dos platelet, kesan khusus sel darah putih tertentu, dan kesan kepekatan PGF dan sitokin terhadap kesan pemakanan sel stem mesenchymal (MSC) akan diterangkan, termasuk PRP menyasarkan berbeza. persekitaran sel dan tisu selepas transduksi isyarat sel dan kesan paracrine.Begitu juga, kita akan membincangkan mekanisme PRP yang berkaitan dengan keradangan dan angiogenesis semasa pembaikan dan penjanaan semula tisu.Akhir sekali, kami akan mengkaji kesan analgesik PRP, kesan beberapa ubat pada aktiviti PRP, dan gabungan PRP dan program pemulihan.
Prinsip asas terapi plasma kaya platelet klinikal
Persediaan PRP semakin popular dan digunakan secara meluas dalam pelbagai bidang perubatan.Prinsip saintifik asas rawatan PRP ialah suntikan platelet pekat di tapak yang cedera boleh memulakan pembaikan tisu, sintesis tisu penghubung baru dan pembinaan semula peredaran darah dengan melepaskan banyak faktor aktif secara biologi (faktor pertumbuhan, sitokin, lisosom) dan protein lekatan yang bertanggungjawab untuk memulakan tindak balas lata hemostatik.Selain itu, protein plasma (cth fibrinogen, prothrombin, dan fibronektin) terdapat dalam komponen plasma miskin platelet (PPP).Pekat PRP boleh merangsang pembebasan hiperfisiologi faktor pertumbuhan untuk memulakan penyembuhan kecederaan kronik dan mempercepatkan proses pembaikan kecederaan akut.Pada semua peringkat proses pembaikan tisu, pelbagai faktor pertumbuhan, sitokin dan pengawal selia tindakan tempatan menggalakkan kebanyakan fungsi sel asas melalui mekanisme endokrin, parakrin, autokrin dan endokrin.Kelebihan utama PRP termasuk keselamatannya dan teknologi penyediaan peralatan komersil semasa yang bijak, yang boleh digunakan untuk menyediakan agen biologi yang boleh digunakan secara meluas.Paling penting, berbanding dengan kortikosteroid biasa, PRP ialah produk autogen tanpa kesan sampingan yang diketahui.Walau bagaimanapun, tiada peraturan yang jelas mengenai formula dan komposisi komposisi PRP suntikan, dan komposisi PRP mempunyai perubahan besar dalam platelet, kandungan sel darah putih (WBC), pencemaran sel darah merah (RBC), dan kepekatan PGF.
Terminologi dan klasifikasi PRP
Selama beberapa dekad, pembangunan produk PRP yang digunakan untuk merangsang pembaikan dan penjanaan semula tisu telah menjadi bidang penyelidikan penting biobahan dan sains dadah.Lata penyembuhan tisu termasuk ramai peserta, termasuk platelet dan faktor pertumbuhannya serta butiran sitokin, sel darah putih, matriks fibrin dan banyak sitokin sinergistik lain.Dalam proses lata ini, proses pembekuan yang kompleks akan berlaku, termasuk pengaktifan platelet dan ketumpatan seterusnya dan α- Pembebasan kandungan zarah platelet, pengagregatan fibrinogen (dilepaskan oleh platelet atau bebas dalam plasma) ke dalam rangkaian fibrin, dan pembentukan embolisme platelet.
PRP "Universal" mensimulasikan permulaan penyembuhan
Pada mulanya, istilah "plasma kaya platelet (PRP)" dipanggil pekat platelet yang digunakan dalam perubatan pemindahan darah, dan ia masih digunakan sehingga kini.Pada mulanya, produk PRP ini hanya digunakan sebagai pelekat tisu fibrin, manakala platelet hanya digunakan untuk menyokong pempolimeran fibrin yang lebih kuat untuk meningkatkan pengedap tisu, dan bukannya sebagai perangsang penyembuhan.Selepas itu, teknologi PRP direka bentuk untuk mensimulasikan permulaan lata penyembuhan.Selepas itu, teknologi PRP telah diringkaskan melalui keupayaannya untuk memperkenalkan dan melepaskan faktor pertumbuhan ke dalam persekitaran mikro tempatan.Keghairahan untuk penghantaran PGF ini sering menyembunyikan peranan penting komponen lain dalam derivatif darah ini.Semangat ini diperhebatkan lagi kerana kekurangan data saintifik, kepercayaan mistik, minat komersial dan kekurangan penyeragaman dan pengelasan.
Biologi pekat PRP adalah kompleks seperti darah itu sendiri, dan mungkin lebih kompleks daripada ubat tradisional.Produk PRP adalah biomaterial hidup.Keputusan penggunaan PRP klinikal bergantung pada ciri intrinsik, universal dan adaptif darah pesakit, termasuk pelbagai komponen selular lain yang mungkin wujud dalam sampel PRP dan persekitaran mikro tempatan reseptor, yang boleh berada dalam keadaan akut atau kronik.
Ringkasan terminologi PRP yang mengelirukan dan sistem klasifikasi yang dicadangkan
Selama bertahun-tahun, pengamal, saintis dan syarikat telah dibelenggu oleh salah faham awal dan kecacatan produk PRP dan istilahnya yang berbeza.Sesetengah penulis mendefinisikan PRP sebagai platelet sahaja, manakala yang lain menunjukkan bahawa PRP juga mengandungi sel darah merah, pelbagai sel darah putih, fibrin dan protein bioaktif dengan peningkatan kepekatan.Oleh itu, banyak agen biologi PRP yang berbeza telah diperkenalkan ke dalam amalan klinikal.Adalah mengecewakan bahawa kesusasteraan biasanya tidak mempunyai penerangan terperinci tentang agen biologi.Kegagalan penyeragaman penyediaan produk dan pembangunan sistem klasifikasi seterusnya membawa kepada penggunaan sejumlah besar produk PRP yang diterangkan oleh istilah dan singkatan yang berbeza.Tidak menghairankan bahawa perubahan dalam persediaan PRP membawa kepada hasil pesakit yang tidak konsisten.
Kingsley mula-mula menggunakan istilah "plasma kaya platelet" pada tahun 1954. Bertahun-tahun kemudian, Ehrenfest et al.Sistem klasifikasi pertama berdasarkan tiga pembolehubah utama (kandungan platelet, leukosit dan fibrin) telah dicadangkan, dan banyak produk PRP dibahagikan kepada empat kategori: P-PRP, LR-PRP, fibrin kaya platelet tulen (P-PRF) dan leukosit kaya PRF (L-PRF).Produk ini disediakan oleh sistem tertutup automatik sepenuhnya atau protokol manual.Sementara itu, Everts et al.Kepentingan menyebut sel darah putih dalam persediaan PRP ditekankan.Mereka juga mengesyorkan penggunaan istilah yang sesuai untuk menandakan versi sediaan PRP dan gel platelet yang tidak aktif atau diaktifkan.
Delong et al.mencadangkan sistem klasifikasi PRP yang dipanggil platelet, sel darah putih diaktifkan (PAW) berdasarkan bilangan mutlak platelet, termasuk empat julat kepekatan platelet.Parameter lain termasuk penggunaan pengaktif platelet dan kehadiran atau ketiadaan sel darah putih (iaitu neutrofil).Mishra et al.Sistem klasifikasi yang serupa dicadangkan.Beberapa tahun kemudian, Mautner dan rakan-rakannya menerangkan sistem klasifikasi (PLRA) yang lebih terperinci dan terperinci.Penulis membuktikan bahawa adalah penting untuk menerangkan kiraan platelet mutlak, kandungan sel darah putih (positif atau negatif), peratusan neutrofil, RBC (positif atau negatif) dan sama ada pengaktifan eksogen digunakan.Pada tahun 2016, Magalon et al.Klasifikasi DEPA berdasarkan dos suntikan platelet, kecekapan pengeluaran, ketulenan PRP yang diperolehi dan proses pengaktifan telah diterbitkan.Selepas itu, Lana dan rakan-rakannya memperkenalkan sistem klasifikasi MARSPILL, memfokuskan pada sel mononuklear darah periferi.Baru-baru ini, Jawatankuasa Standardisasi Saintifik menganjurkan penggunaan sistem klasifikasi Persatuan Antarabangsa untuk Trombosis dan Hemostasis, yang berdasarkan siri cadangan konsensus untuk menyeragamkan penggunaan produk platelet dalam aplikasi perubatan regeneratif, termasuk produk platelet beku dan cair.
Berdasarkan sistem klasifikasi PRP yang dicadangkan oleh pelbagai pengamal dan penyelidik, banyak percubaan yang tidak berjaya untuk menyeragamkan pengeluaran, definisi dan formula PRP yang akan digunakan oleh doktor boleh membuat kesimpulan yang adil, yang mungkin tidak akan berlaku dalam beberapa tahun akan datang. , teknologi produk PRP klinikal terus berkembang, dan data saintifik menunjukkan bahawa persediaan PRP yang berbeza diperlukan untuk merawat patologi yang berbeza di bawah keadaan tertentu.Oleh itu, kami menjangkakan bahawa parameter dan pembolehubah pengeluaran PRP yang ideal akan terus berkembang pada masa hadapan.
Kaedah penyediaan PRP sedang dijalankan
Menurut istilah PRP dan penerangan produk, beberapa sistem klasifikasi dikeluarkan untuk formulasi PRP yang berbeza.Malangnya, tiada konsensus mengenai sistem klasifikasi komprehensif PRP atau mana-mana darah dan produk darah autologus lain.Sebaik-baiknya, sistem klasifikasi harus memberi perhatian kepada pelbagai ciri PRP, definisi dan tatanama yang sesuai berkaitan dengan keputusan rawatan pesakit dengan penyakit tertentu.Pada masa ini, aplikasi ortopedik membahagikan PRP kepada tiga kategori: fibrin kaya platelet tulen (P-PRF), PRP yang kaya dengan leukosit (LR-PRP) dan PRP kekurangan leukosit (LP-PRP).Walaupun ia lebih khusus daripada definisi produk PRP umum, kategori LR-PRP dan LP-PRP jelas tidak mempunyai sebarang kekhususan dalam kandungan sel darah putih.Disebabkan oleh mekanisme pertahanan imun dan perumahnya, sel darah putih telah banyak mempengaruhi biologi intrinsik penyakit tisu kronik.Oleh itu, agen biologi PRP yang mengandungi sel darah putih tertentu boleh menggalakkan peraturan imun dan pembaikan dan penjanaan semula tisu dengan ketara.Lebih khusus lagi, limfosit banyak terdapat dalam PRP, menghasilkan faktor pertumbuhan seperti insulin dan menyokong pembentukan semula tisu.
Monosit dan makrofaj memainkan peranan penting dalam proses pengawalan imun dan mekanisme pembaikan tisu.Kepentingan neutrofil dalam PRP tidak jelas.LP-PRP telah ditentukan sebagai penyediaan PRP pertama melalui penilaian sistematik untuk mencapai hasil rawatan OA sendi yang berkesan.Walau bagaimanapun, Lana et al.Penggunaan LP-PRP dalam rawatan OA lutut adalah bertentangan, yang menunjukkan bahawa sel darah putih tertentu memainkan peranan penting dalam proses keradangan sebelum penjanaan semula tisu, kerana ia melepaskan molekul pro-radang dan anti-radang.Mereka mendapati bahawa gabungan neutrofil dan platelet yang diaktifkan mempunyai lebih banyak kesan positif daripada kesan negatif terhadap pembaikan tisu.Mereka juga menegaskan bahawa keplastikan monosit adalah penting untuk fungsi tidak keradangan dan pembaikan dalam pembaikan tisu.
Laporan skim penyediaan PRP dalam penyelidikan klinikal adalah sangat tidak konsisten.Kebanyakan kajian yang diterbitkan tidak mencadangkan kaedah penyediaan PRP yang diperlukan untuk kebolehulangan skim tersebut.Tiada konsensus yang jelas antara tanda rawatan, jadi sukar untuk membandingkan produk PRP dan hasil rawatan yang berkaitan.Dalam kebanyakan kes yang dilaporkan, terapi kepekatan platelet dikelaskan di bawah istilah "PRP", walaupun untuk petunjuk klinikal yang sama.Bagi sesetengah bidang perubatan (seperti OA dan tendinosis), kemajuan telah dicapai dalam memahami perubahan persediaan PRP, laluan penghantaran, fungsi platelet dan komponen PRP lain yang mempengaruhi pembaikan tisu dan penjanaan semula tisu.Walau bagaimanapun, kajian lanjut diperlukan untuk mencapai kata sepakat mengenai terminologi PRP yang berkaitan dengan agen biologi PRP untuk merawat patologi dan penyakit tertentu dengan sepenuhnya dan selamat.
Status sistem klasifikasi PRP
Penggunaan bioterapi PRP autologus bermasalah dengan kepelbagaian persediaan PRP, penamaan yang tidak konsisten dan piawaian garis panduan berasaskan bukti yang lemah (iaitu, terdapat banyak kaedah penyediaan untuk menghasilkan botol rawatan klinikal).Ia boleh diramalkan bahawa kandungan PRP mutlak, ketulenan dan ciri biologi PRP dan produk berkaitan sangat berbeza-beza, dan menjejaskan keberkesanan biologi dan keputusan percubaan klinikal.Pemilihan peranti penyediaan PRP memperkenalkan pembolehubah utama yang pertama.Dalam perubatan regeneratif klinikal, pengamal boleh menggunakan dua peralatan dan kaedah penyediaan PRP yang berbeza.Penyediaan menggunakan pemisah sel darah standard, yang beroperasi pada darah lengkap yang dikumpulkan dengan sendirinya.Kaedah ini menggunakan teknologi pemisahan drum atau cakera emparan aliran berterusan dan langkah emparan keras dan lembut.Kebanyakan peranti ini digunakan dalam pembedahan.Kaedah lain ialah menggunakan teknologi dan peralatan emparan graviti.Sentrifugasi daya G tinggi digunakan untuk memisahkan lapisan kuning ESR daripada unit darah yang mengandungi platelet dan sel darah putih.Alat kepekatan ini lebih kecil daripada pemisah sel darah dan boleh digunakan di sebelah katil.Dalam perbezaan ģ – Daya dan masa sentrifugasi membawa kepada perbezaan ketara dalam hasil, kepekatan, ketulenan, daya maju, dan keadaan diaktifkan bagi platelet terpencil.Banyak jenis peralatan penyediaan PRP komersil boleh digunakan dalam kategori terakhir, mengakibatkan perubahan selanjutnya dalam kandungan produk.
Kekurangan konsensus mengenai kaedah penyediaan dan pengesahan PRP terus membawa kepada ketidakkonsistenan rawatan PRP, dan terdapat perbezaan besar dalam penyediaan PRP, kualiti sampel dan keputusan klinikal.Peralatan PRP komersil sedia ada telah disahkan dan didaftarkan mengikut spesifikasi pengeluar proprietari, yang menyelesaikan pembolehubah berbeza antara peralatan PRP yang tersedia pada masa ini.
Fahami dos platelet in vitro dan in vivo
Kesan terapeutik PRP dan pekat platelet lain berpunca daripada pembebasan pelbagai faktor yang terlibat dalam pembaikan dan penjanaan semula tisu.Selepas pengaktifan platelet, platelet akan membentuk trombus platelet, yang akan berfungsi sebagai matriks ekstraselular sementara untuk menggalakkan percambahan dan pembezaan sel.Oleh itu, adalah adil untuk mengandaikan bahawa dos platelet yang lebih tinggi akan membawa kepada kepekatan tempatan faktor bioaktif platelet yang lebih tinggi.Walau bagaimanapun, korelasi antara dos dan kepekatan platelet dan kepekatan faktor pertumbuhan bioaktif platelet yang dikeluarkan dan ubat mungkin tidak dapat dikawal, kerana terdapat perbezaan yang ketara dalam kiraan platelet asas antara pesakit individu, dan terdapat perbezaan antara kaedah penyediaan PRP.Begitu juga, beberapa faktor pertumbuhan platelet yang terlibat dalam mekanisme pembaikan tisu terdapat dalam bahagian plasma PRP (contohnya, faktor pertumbuhan hati dan faktor pertumbuhan seperti insulin 1).Oleh itu, dos platelet yang lebih tinggi tidak akan menjejaskan potensi pembaikan faktor pertumbuhan ini.
Penyelidikan PRP in vitro sangat popular kerana parameter yang berbeza dalam kajian ini boleh dikawal dengan tepat dan hasilnya boleh diperoleh dengan cepat.Beberapa kajian telah menunjukkan bahawa sel bertindak balas terhadap PRP dalam cara yang bergantung kepada dos.Nguyen dan Pham menunjukkan bahawa kepekatan GF yang sangat tinggi tidak semestinya kondusif untuk proses rangsangan sel, yang mungkin tidak produktif.Beberapa kajian in vitro telah menunjukkan bahawa kepekatan PGF yang tinggi mungkin mempunyai kesan buruk.Satu sebab mungkin bilangan reseptor membran sel yang terhad.Oleh itu, apabila tahap PGF terlalu tinggi berbanding dengan reseptor yang ada, ia akan memberi kesan negatif terhadap fungsi sel.
Kepentingan data kepekatan platelet secara in vitro
Walaupun penyelidikan in vitro mempunyai banyak kelebihan, ia juga mempunyai beberapa kelemahan.In vitro, disebabkan interaksi berterusan antara pelbagai jenis sel yang berbeza dalam mana-mana tisu disebabkan oleh struktur tisu dan tisu selular, sukar untuk mereplikasi secara in vitro dalam persekitaran kultur tunggal dua dimensi.Ketumpatan sel yang boleh menjejaskan laluan isyarat sel biasanya kurang daripada 1% daripada keadaan tisu.Tisu hidangan kultur dua dimensi menghalang sel daripada terdedah kepada matriks ekstraselular (ECM).Di samping itu, teknologi kultur tipikal akan membawa kepada pengumpulan sisa sel dan penggunaan nutrien yang berterusan.Oleh itu, kultur in vitro adalah berbeza daripada sebarang keadaan mantap, bekalan oksigen tisu atau pertukaran medium kultur secara tiba-tiba, dan keputusan yang bercanggah telah diterbitkan, membandingkan kesan klinikal PRP dengan kajian in vitro sel tertentu, jenis tisu dan platelet. kepekatan.Graziani dan lain-lain.Didapati bahawa secara in vitro, kesan terbesar terhadap percambahan osteoblas dan fibroblas dicapai pada kepekatan platelet PRP 2.5 kali lebih tinggi daripada nilai asas.Sebaliknya, data klinikal yang disediakan oleh Park dan rakan sekerja menunjukkan bahawa selepas gabungan tulang belakang, paras platelet PRP perlu ditingkatkan lebih daripada 5 kali ganda daripada garis dasar untuk mendorong hasil yang positif.Keputusan bercanggah yang sama juga dilaporkan antara data percambahan tendon secara in vitro dan keputusan klinikal.
（Kandungan artikel ini dicetak semula, dan kami tidak memberikan sebarang jaminan nyata atau tersirat untuk ketepatan, kebolehpercayaan atau kesempurnaan kandungan yang terkandung dalam artikel ini, dan tidak bertanggungjawab terhadap pendapat artikel ini, sila faham.）
Masa siaran: Mac-01-2023